Лабораторное исследование на гельминты

Материал для исследования: фекалии, моча, дуоденальное содержимое, мокрота, кровь, кожа, перианальный дендрит, мышечная ткань.

Макроскопические методы основаны на обнаружении особей гельминтов или их фрагментов (члеников, сколексов). Они применяются как с диагностическими целями (энтеробиоз), так и с целью контроля эффективности лечения. Принцип исследования состоит в том, что гельминты и их фрагменты хорошо видны при проведении фракционного метода. Дифференциация между отделенными видами паразитов основывается на анатомии и морфологии.

Микроскопические методы исследования основаны на обнаружении яиц и личинок гельминтов. В зависимости от целей исследования они делятся качественные и количественные.

Качественные методы диагностики паразитов

Фекалии, подлежащие исследованию на паразиты, должны быть свежими, не более суток. Кал собирают в одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой и ложечкой (их можно получить в любом медицинском офисе ИНВИТРО под залог) в количестве не более 1/3 объема контейнера. В настоящее время во многих поликлиниках используются спичечные коробки, флаконы.

1. Метод толстого мазка по Като. Принцип метода состоит в том, что яйца гельминтов обнаруживается в толстом мазке фекалий, просветленных глицерином и подкрашенных малахитовой зеленью. Метод более всего эффективен при аскаридозе, трихоцефалезе, дифиллоботриозе, тениидозах и в меньшей степени- при анкилостомидозах и карликовом цепне.

2. Метод закручивания. Этот метод прост, позволяет выявить яйца всех паразитов. 2-3 грамма фекалий размешивают стеклянной палочкой при постепенном добавлении воды, затем энергичными движениями «закручивают» взвесь испражнений, берут каплю, жидкости и рассматривают под микроскопом.

3. Метод обогащения (Кофоида — Барбера) основан на принципе всплывания яиц в насыщенном растворе поваренной соли. Можно обнаружить яйца трематод, широкого лентеца, онкосферы, тениды, неоплодотворенные яйца аскарид.

Задайте их инфекционисту.

4. Метод Калантарян – принцип тот же, что и при предыдущем, но в качестве флотационного раствора используют насыщенный раствор азотистой селитры.

5. Существуют специальные методы исследования фекалий на наличие фасцилеза, стронгилоидоза, анкилостомидоза.

6. Прианальный и перианально-ректальный метод диагностики энтеробиоза. Соскоб делают утром (до туалета и дефекации) или вечером во время сна.

Количественный метод Столла. Определение количества паразитов в мазке.

Очень важно знать

Как правильно собирать анализы на гельминтов

  • Кал собирают из разных мест столбика стула. Необходимо помнить, что паразиты лучше выявляются на полную луну!
  • «Барьерный» анализ (при госпитализации, оформлении медицинской книжки и т. д.)
  • Во время сбора избегать примесей мочи, отделяемого половых органов. До отправки в лабораторию материал должен храниться в холодильнике при 4. 8С.

По всем нормативным документам все методы определения паразитов в фекалиях доступны в каждой поликлинике. Платно можно сделать в любой частной лаборатории.

Диагностика гельминтозов

Гельминтозы и протозоозы наносят значительный ущерб здоровью человека. Заболевание может проявляться абдоминальным, аллергическим, анемическим синдромом, хроническим токсикозом, глисты и простейшие могут поражать ткани печени, легких, желчевыводящих путей, головного мозга, глаза.

Гельминтозы не имеют специфических симптомов, поэтому присутствие паразита можно подтвердить только лабораторными и инструментальными методами. Диагностика гельминтозов может включать гельминтоовоскопию, гельминтоларвоскопию, серологические методы, а также рентген, эндоскопию, УЗИ.

Методы диагностики гельминтозов

Исследование на гельминтозы назначается при появлении характерных клинических симптомов и на основании эпидемиологического анамнеза (содержание в доме животных, посещение зараженных мест, возможное употребление зараженного мяса или воды). Лабораторная диагностика гельминтозов может проводиться в течение нескольких часов или дней, что зависит от вида паразита, который предположительно провоцирует возникновение симптомов.

Паразитологические методы могут быть прямыми, то есть заключаются в обнаружении паразита, его фрагмента или личинки, или же применяются иммунологические методы, которые позволяют обнаружить гельминта в личиночной стадии развития, в фазе миграции, при паразитировании только самца, несильной инвазии, а также если у червя угасла или еще не развилась репродуктивная функция.

Исследование испражнений

В диагностике гельминтов большое значение имеет копрологическое исследование, поскольку большинство глистов паразитируют в кишечнике, а их яйца выделяются вместе с калом. Каловые массы исследуют макроскопическим и микроскопическим способом.

С помощью макроскопического метода в фекалиях обнаруживают гельминтов или их части. В чашке Петри или небольшой плоской емкости кал смешивают с водой и рассматривают через лупу. При достаточном количестве света на темном фоне удается обнаружить белые фрагменты глиста. Все подозрительные вкрапления перекладывают на предметное стекло с глицерином для дальнейшего рассмотрения под увеличением.

Для обнаружения части гельминта может использоваться и метод отстаивания. Фекалии смешивают с водой и позволяют отстояться, после этого сливают воду. После нескольких отстаиваний, когда вода уже будет прозрачной, жидкость выливают, а осадок рассматривают в чашке Петри. При микроскопии испражнений за яйца глиста могут приниматься пузырьки воздуха, растительные клетки, споры и пыльца растений, частички непереваренной пищи.

В сомнительных случаях необходимо проводить повторные анализы. Методические указания (МУК), разработанные в 2013 году, устанавливают порядок применения метода отбора проб и описывают методы лабораторных исследований биоматериала, что позволяет применять наиболее современные методы для лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов и корректно расшифровывать их результаты.

Микроскопический метод помогает выявить личинки паразитов или их яиц. Наиболее применяемым и доступным считается нативный мазок, который позволяет увидеть яйца и личинки всех глистов. Небольшое количество перемешенного кала наносят на предметное стекло, смазанное глицерином, и рассматривают при небольшом увеличении.

Методы обогащения

В методах используется то, что имея различный вес личинки паразитов всплывают на поверхность физиологического раствора или, наоборот, оседают на дно. Если яйца тяжелее жидкости, то они скапливаются в осадке (метод седиментации позволяет выявить яйца трематод), а если легче, то яйца всплывают (метод флотации позволяет увидеть яйца власоглава, карликового цепня, анкилостомид).

Метод Фюллеборга

В стеклянную банку помещают 2–5 г кала и заливают физиологическим раствором (400 грамм соли на литр воды), затем размешивают и дают отстояться. Спустя 45 минут, образовавшуюся пленку помещают на предметное стекло с глицерином. Другой способ поместить пленку на стекло: долить в сосуд воды до краев и накрыть предметным стеклом.

В соленой воде яйца всплывают и их можно увидеть в микроскоп, но у различных гельминтов яйца поднимаются на поверхность жидкости с различной скоростью (карликового цепня спустя четверть часа, аскарид через полтора–два часа, власоглава только через 2–3 часа). Помимо образовавшейся поверхностной пленки, обязательно нужно исследовать и осадок, так как яйца тениид, трематод, аскарид тонут при данной концентрации солевого раствора.

Преимуществами данного метода является его доступность, низкая стоимость и высокая эффективность, поэтому его часто сочетают с нативным мазком. Среди недостатков данного способа диагностики гельминтоза можно выделить необходимость исследования поверхностного слоя и осадка, а также продолжительное время для отстаивания.

Метод Калантарян

Также предполагает использование насыщенного раствора натрия, но только меньшей относительной плотностью (килограмм соли нитрата натрия на литр воды), что приводит к всплытию большинства яиц гельминтов, а значит рассматривать осадок не требуется.

К недостаткам данного метода диагностики гельминтозов относят необходимость использования большого количества соли натрия и азотистой кислоты, кроме того, онкосферы тениид и яйца трематод не поднимаются на поверхность. Если раствор стоит дольше 1–2 часов, то яйца некоторых глистов набухают и уходят в осадок.

Метод Горячева

Предполагает осаждение яиц. В емкость переливают раствор изотонический. В отдельной банке смешивают фекалии с водой, отфильтровывают через марлю, и наливают поверх солевого раствора, так чтобы получилось два слоя. Спустя 2–3 часа, слой с калом убирают при помощи пипетки, а второй слой оставляют еще на 12–20 часов или помещают в центрифугу.

Осадок переливают на предметное стекло и рассматривают в микроскоп. Данный метод был предложен для поиска возбудителя описторхоза и оказался более информативным, чем микроскопия нативного мазка или метод Фюллеборна, однако, он почти не используются, поскольку технически сложен.

Метод Красильникова

ПАВы, которые входят в состав стиральных порошков, освобождают яйца глистов от кала, и тем самым способствуют выпадению их в осадок. Десять грамм моющего средства растворяют в литре воды. Наливают раствор в стеклянную банку, добавляют туда испражнения и перемешивают.

За сутки в растворе образуется осадок из нескольких слоев. На дне оседают крупные частицы, в среднем слое концентрируются яйца гельминтов, вверх всплывают сероватые хлопья. Для исследования берут пипеткой 2–3 капли жидкости из второго слоя.

Эфир-уксусный метод

Дает возможность выявить даже мелкие яйца трематод, кишечных глистов и цисты простейших, он также применяется, чтобы определить интенсивность инвазии. Фекалии помещают в емкости с уксусной кислотой и перемешивают до однородности, затем процеживают, переливают во вторую пробирку и доливают эфир. Все взбалтывают и помещают в центрифугу. Образовавшийся верхний слой снимают, а осадок наносят на предметное стекло и изучают под микроскопом.

Поиск живых личинок

Закручивания по Шульману позволяет обнаружить в каловых массах живых личинок глистов (в частности, стронгилоида). Для анализа берется только свежий кал. Его опускают в стеклянную банку с физиологическим раствором, и размешивают круговыми движениями, не дотрагиваясь до стенок. Яйца и личинки паразитов концентрируются в центре. После перемешивания стеклянной палочкой (которой мешали) делают мазки на предметном стекле.

Это интересно:  Гельминты интересные факты

Метод Бермана

Использует то, что личинка двигается по направлению к теплу. С помощью данного диагностического метода можно выявить сгронгилоидоз. Так, 20–50 грамм фекалий кладут на металлическую сетку и ставят ее в воронку, в которую наливают теплую воду (40–50 ⁰С). Личинки перемещаются из кала в воду. Их оставляют отстаиваться в течение 3–4 часов. Отстоявшуюся жидкость помещают в центрифугу, а затем исследуют.

Метод Харада и Мори

Данный метод советует ВОЗ для обнаружения анкилостомидоза у людей и проводится при необходимости дифференцировать анкилостомоз от некатороза. В центр фильтрованной бумаги наносят полграмма кала. Затем бумагу опускают в пробирку таким образом, что чистый конец оказывается в воде, а верхняя часть закрепляется пробкой, при этом фекалии не касаются воды. Пробирку помещают в термостат на 5–6 суток. За это время филяриевидные личинки оседают и их можно увидеть через лупу.

Проверка перианального соскоба

Данный метод применяется для обнаружения яиц остриц и бычьего цепня. Он предполагает проверку перианального смыва или соскоба. Сбор материала проводится утром до акта дефекации (у девушек и до мочеиспускания) или вечером, спустя 2–3 часа после того, как пациент заснул. У детей образец может быть взят после дневного сна.

Для соскоба может использоваться ватный тампон или палочка, а также клейкая лента. Ватным тампоном проводят в области перианальных складок и возле ануса. Палочку с тампоном опускают в пробирку и отправляют в лабораторию. Лаборант делает мазки на предметных стеклах и микроскопирует их.

Метод Грэхема или липкой ленты

Также является эффективным, поскольку позволяет диагностировать аскаридоз и обнаружить онкосферы тениид. Для сбора материала используется прозрачная клейкая лента длиной в 4–5 см. Ее липкой стороной прикасаются к перианальным складкам, быстро снимают и клеят на предметное стекло. Преимущество метода в том, что можно долго хранить образец.

Дополнительные способы

Лабораторная диагностика гельминтозов может включать:

Анализ на гельминтозы как сдавать

Что такое гельминтозы?

Гельминтозы составляют самую крупную группу заболеваний, вызываемых паразитами. Их возбудителями на территории России являются 20 – 30 видов червей. Гельминты могут обитать в пищеварительной системе человека (аскариды, власоглав) или в других органах и системах (эхинококки). По этому признаку паразитов можно разделить на живущих в просвете или в тканях организма.

Какие биологические материалы используются для диагностики?

Чтобы установить диагноз конкретного гельминтоза, необходимо сдать на исследование биологический материал, содержащий возбудителя или антитела к нему. После этого происходит определение вида червя лабораторным способом. Используются следующие биологические материалы для исследования:

  • моча;
  • фекалии;
  • дуоденальное содержимое;
  • мокрота;
  • кровь;
  • слизь;
  • материал, полученный при биопсии (мышца).

Какие анализы назначаются для диагностики кишечных гельминтозов?

Кишечные гельминтозы получили значительное распространение благодаря простому (фекально-оральному) механизму передачи. Они маскируются под различные заболевания ЖКТ. Опираясь на жалобы и течение болезни, невозможно поставить диагноз. Самым простым способом обнаружить гельминтов является исследование:

  • испражнений макроскопическим способом – в каловых массах невооруженным взглядом можно увидеть целых взрослых особей (аскарид, остриц) и их фрагменты (ленточных червей и т.д.);
  • испражнений микроскопическим способом – кал на яйца глист может быть выполнен с использованием методики толстого мазка, флотации или седиментации, с их помощью могут быть обнаружены личинки гельминтов и их яйца;
  • крови серологическим методом – при этом будет выявляться не сам возбудитель, а уровень реакции организма на его внедрение; в этом случае обнаруживаются антитела (иммуноглобулины) к конкретным гельминтам.

Уровень неспецифического IgЕ обладает низким диагностическим потенциалом; увеличение его концентрации в крови может быть связано с аллергической реакцией, а уменьшение (даже на фоне существующего гельминтоза) может свидетельствовать о иммунодефицитном состоянии.

Эффективность определения специфического IgG выше, что позволяет использовать его при диагностике гельминтозов (описторхоза и др.). Это особенно важно, если не происходит выделения яиц.

Для того чтобы узнать, какой анализ следует сдать, нужно обратиться к врачу.

Как выявляются тканевые гельминты?

Помимо клинических методов диагностики, широко применяются лабораторные методы исследования. Наиболее информативным у этого вида возбудителя будет использование серологической диагностики. К ней относятся: реакция непрямой гемагглютинации, связывание комплимента, агглютинация лизиса, иммуноферментный анализ, иммунофлюоресценция и т.д.

В случаях глубокого залегания возбудителя в ткани получить материал для анализа невозможно. При расположении гельминта в капсуле, разрушение которой приведет к обсеменению здоровых тканей, биопсию также не производят. В этих случаях единственным лабораторным методом исследования будет обнаружение IgG к конкретному возбудителю (эхинококку и т.д.) в крови.

Если цикл развития возбудителя предполагает его присутствие в крови, то выявить его можно путем исследования крови. Используя мазок и толстую каплю, после окрашивания методом Романовского-Гимзы можно увидеть самих гельминтов (микрофилярий и т.д.).

В диагностический комплекс обнаружения тканевых возбудителей входят инструментальные методы диагностики:

  • рентгенография;
  • УЗИ – применяется для исследования паренхиматозных органов, мышц;
  • компьютерная томография – простой и информативный метод, эффективный даже при труднодоступной локализации гельминтов;
  • эндоскопический метод – дополнительным преимуществом использования малоинвазивных способов диагностики является возможность проведения биопсии для дальнейшего анализа.

Как проводится подготовка к исследованию на гельминтозы?

Для повышения информативности полученного биологического материала необходимо соблюдать правила подготовки:

  • для сдачи кала на яйца гельминтов его необходимо собрать в стерильный контейнер до 1/3 объема, затем закрыть его крышкой и доставить в лабораторию, соблюдая температуру 4 – 9°С;
  • кровь для серологического исследования необходимо сдавать не ранее 4 часов с момента приема пищи;
  • при заборе дуоденального содержимого может понадобиться прием желчегонных средств.

Анализ кала

Исследование каловых масс на наличие живых паразитов и их яиц является одной из самых доступных и популярных форм лабораторной диагностики. При этом диагностическая ценность этого способа оставляет желать лучшего. С его помощью невозможно обнаружить внекишечные формы гельминтозов, а также паразитов на начальной стадии их развития, когда самки еще не откладывают яйца. Для обеспечения необходимой достоверности результатов анализ кала рекомендуется проводить не менее 3 раз, с интервалов в 4-7 дней. Об отсутствии кишечных гельминтов можно говорить только тогда, когда результаты всех трех анализов окажутся отрицательными.

Забор биоматериала не требует специальной подготовки пациента. С вечера перед процедурой рекомендуется отказаться от употребления свеклы и других продуктов, которые могут изменить цвет или консистенцию каловых масс, однако это не обязательно. Кал не забирают, если пациент на протяжении предыдущей недели принимал антигельминтные лекарства с профилактической целью. Тогда тест откладывают.

Само по себе исследование может быть макроскопическим и микроскопическим. Макроскопическое исследование основано на визуальном осмотре препаратов кала невооруженным глазом или отсеивании паразитов с помощью системы сит. При этом удается выявить только половозрелые формы гельминта и иногда его яйца. В условиях широкого разнообразия видов кишечных червей макроскопическое исследование каловых масс практически не имеет диагностического значения.

Микроскопическое исследование требует приготовления специальных препаратов из кала пациента и является гораздо более точным, чем его макроскопическая разновидность.

  1. Метод нативного мазка: кусочек кала растирают, предварительно смешав с каплей 50% раствора глицерина. После этого из полученного препарата удаляются крупные конкременты, а сам препарат наносится двумя длинными мазками на предметное стекло, покрывается покровным стеклом и изучается под микроскопом. Информативность метода не слишком высока, поэтому на начальных стадиях гельминтозов у человека лаборатория часто дает отрицательный результат.
  2. Толстый мазок по Като с целлофаном: для приготовления препарата берут небольшой кусочек гидрофильного целлофана, в течение суток вымачиваемого в смеси глицерина (50 мл), фенола (500 мл) и зеленой малахитовой (6 мл). Небольшое количество кала растирают по предметному стеклу, накрывают целлофаном и подсушивают, предварительно придавив резиновой пробкой пятого номера. По прошествии получаса в препарате становятся хорошо видны яйца паразитических червей.
  3. Метод Телеманна: 5 граммов каловых масс смешивают с 1 мл этилового эфира и 3-4 мл соляной кислоты, имеющей концентрацию не более 50%. Далее препарат тщательно перемешивают, фильтруют через марлю, центрифугируют, после чего полученную твердую фракцию изучают под микроскопом.

Для выявления личинок таких паразитов, как шистисома и анкилостома применяется методика гельминтоларвоскопического культивирования. Ее суть заключается в создании для личинки локализованных идеальных условий для жизни и размножения. При этом паразиты будут скапливаться в подобном месте, что позволит выявить их наличие.

На заметку: при проведении лабораторной диагностики по методу Телеманна концентрация соляной кислоты не должна превышать 50%. Иначе яйца гельминтов будут разрушены, что существенно затруднит или сделает невозможным их выявление. Развести кислоту можно с использованием обычной кипяченой воды.

Под термином «скотч-тест» подразумевается взятие соскоба с околоанальных складок, произведенное с помощью липкой ленты. Процедура актуальна только для обнаружения яиц острицы. Что касается людей, которым предстоит процедура, то у них проводится подготовка. Так, за 3 дня до взятия пробы запрещается принимать противоглистные лекарственные средства. С вечера, а также утром перед забором биоматериала не проводятся гигиенические мероприятия зоны ануса и половых органов.

Само по себе проведение теста не является сложным. Необходимо наклеить на анальное отверстие и околоанальную область больного небольшой кусочек липкой ленты, подождать несколько секунд и оторвать ее резким движением. После этого ленту наклеивают на стекло и отправляют в лабораторию.

Исследование материала, полученного по итогу скотч-теста, проводится микроскопическим способом. При необходимости лаборант проводит окрашивание материала. К сожалению, с помощью столь простого способа диагностируется только энтеробиоз. Другие гельминтозы с помощью скотч-теста не выявляются.

Исследование крови

Вторым по частоте использования методом обнаружения паразитов является исследование крови. Лабораторная диагностика гельминтозов при этом может основываться как на непосредственном обнаружении мигрирующих личинок гельминта, так и на исследовании иммунного ответа организма на проникновение инородной формы жизни.

Это интересно:  Дифференциальная диагностика гельминтов

Этот способ обследования является наиболее информативным на начальных этапах заболевания, когда гельминты проходят стадию миграции. Половозрелые формы червя, обитающие в кишечнике, практически не выявляются с помощью исследования крови. Классификация исследований крови на признаки паразитарных болезней включает два вида анализа.

Качественный анализ

Забор биоматериала осуществляется лаборантом или медицинской сестрой. Кровь на исследование берут из вены или из пальца. Первый способ является более предпочтительным, так как позволяет получить большее количество материала и таким образом повысить достоверность результатов. Кровь должна быть доставлена в лабораторию немедленно, после чего из нее сразу же готовят материал для исследования.

Если идентификация вида личинки не требуется, кровь может быть использована в чистом виде, без приготовления препарата. Для этого на предметное стекло тонким слоем наносят квадрат из вазелина, куда капают каплю материала. Полученную смесь приживают вторым стеклом и изучают под микроскопом. Как правило, при этом удается рассмотреть микрофиллярии, расположенные между форменными элементами крови. Они сохраняют подвижность на протяжении 6 часов, после чего гибнут. Однако даже погибшие личинки остаются различимы под микроскопом.

Если необходима точная идентификация гельминта, лаборант окрашивает кровь одним из возможных методов: Циля-Нельсена, Романовского-Гимзе, Райта, Лейшмана. Различные виды личинок по-разному реагируют на процедуру окрашивания и отличаются при визуальном рассмотрении такого препарата под микроскопом. На основании полученных данных лаборант делает вывод о наличии у пациента начальной стадии той или иной глистной инвазии.

Иммуноферментный анализ

В основе иммуноферментного исследования крови лежит изучение реакций иммунитета при гельминтозах. Реакция иммунной системы может развиваться как в ответ на проникновение самого паразита, так и на продукты его жизнедеятельности. Исследование проводится аппаратным методом, роль человека в нем сведена к минимуму. Оценка результатов проводится на основании изменения оптической плотности раствора в зависимости от содержания в нем иммуноглобулинов M или G. IgM выявляют на начальной стадии инвазии. IgG появляется в крови несколько позднее.

Точность методики ИФА по данным большинства источников достигает 90%, что является очень хорошим показателем. Однако способ выявляет не самого паразита, а лишь результат реакции организма на него. Это делает возможным редкие ложноположительные результаты, которые возникают при сохранении иммунного «следа» гельминта, давно отсутствующего в организме.

Многих пациентов интересует не только то, что такое ИФА-анализ на гельминтозы, но и как сдавать биоматериал для этого исследования. Забор крови на иммуноферментный анализ проводят в условиях лаборатории, из вены, натощак. За 2 дня до посещения медицинской организации рекомендуется не употреблять алкоголь, не есть жирную, острую, чрезмерно соленую пищу. Также следует по возможности отказаться от употребления лекарственных средств.

На заметку: временная отмена лекарственных препаратов, принимаемых постоянно, возможна только с разрешения лечащего врача. Самостоятельно отказываться от необходимых лекарств недопустимо даже на короткий срок.

Анализ мокроты берут при подозрении на гельминтное поражение бронхолегочной системы. В дыхательных путях и легких могут локализовываться эхинококки, мигрирующие личинки червей-нематод, шистисомы, легочные сосальщики, некаторы, амебы. Забор материала требует от пациента некоторых подготовительных мероприятий.

  • С вечера перед тем, как брать анализ, пить много теплой воды или чая, принимать отхаркивающие средства;
  • С утра в день забора биоматериала ополоснуть рот антисептическим раствором;
  • Отказаться от чистки зубов с утра перед забором.

Сбор мокроты производят в стерильный или клинически чистый контейнер. Последнее возможно, если планируется только применением методов выявления гельминтов. Иногда, когда наряду с диагностикой гельминтозов планируется и общий анализ мокроты, контейнер должен быть стерильным.

Для определения глистной инвазии в лаборатории мокроту изучают под микроскопом. Предварительно готовится нативный мазок. Способ приготовления не отличается от такового при анализе кала. В мокроте могут обнаруживаться не только яйца, но и фрагменты тел паразитов, а также живые половозрелые формы червей.

Глистами может быть поражена и мочеполовая система пациента. Чаще всего здесь обнаруживаются шистисомы. Подтверждение диагноза тогда производится с помощью исследования мочи на наличие паразитов и признаков их жизнедеятельности. Сбор биоматериала производится в любое время суток. Предварительно следует провести гигиеническую обработку половых органов. При несоблюдении этого условия ответ лаборатории может оказаться ложноположительным за счет попадания в материал яиц гельминтов, не свойственных мочеполовой системе, однако случайно попавших на кожу половых органов. Сбор мочи производят в клинически чистый и плотно закрывающийся контейнер. Материал следует доставить в лабораторию сразу после забора.

  1. Мочу центрифугируют;
  2. Осадок переливают в пробирку черного цвета;
  3. К концу пробирки присоединяют стеклянную трубку;
  4. Добавляют в материал 1:5 часть воды;
  5. Ставят пробирку в термостат с температурой 30°C на 2 часа.

После извлечения пробирки личинки шистисомы становятся видны через трубочку. Они просматриваются как движущиеся светлые точки на темном фоне. При хронической форме болезни выявить возбудителя таким способом удается не всегда. Более информативной является биопсия.

Методы диагностики гельминтозов включают и такой способ выявления паразитарной инвазии, как биопсия. С помощью подобных методов удается выявить паразитов и их личинки, расположенные в коже или внутренних органах больного. Наиболее часто биопсия используется для диагностики трихинеллеза, цистициркоза, шистисомоза.

В зависимости от локализации пораженного участка, существует несколько методов забора материала. Например, срезы с кожи берут путем поддевания ее энтомологической булавкой и отделения участка эпидермиса площадью 1-4 мм скальпелем или лезвием бритвы. Образцы мышечной ткани, а также тканей печени и других внутренних органов берут хирургическим путем, в процессе диагностической операции.

На заметку: в современных клиниках забор биоматериала осуществляется с помощью малоинвазивных эндоскопических процедур. При этом не производится объемного разреза тканей. Размер операционной раны не превышает 1-2 см.

Взятый материал исследуют различными способами. Возможно приготовление его окрашенных препаратов с последующей микроскопией, биопроба на лабораторных животных, применение методов переваривания с помощью искусственного желудочного сока. Все эти способы позволяют с достаточной степенью достоверности определить наличие гельминта или его личинок в тканях.

Видео — гельминтозы и их профилактика

Желчь, гной, содержимое абсцессов

Показателем гельминтного заражения является и наличие паразитов в дуоденальном содержимом, а также в продуктах, полученных при вскрытии абсцессов. Для постановки диагноза материал смешивают с этиловым эфиров в соотношении 1:1, размещают на предметном стекле и изучают под микроскопом. При необходимости могут применяться методики окрашивания препарата.

В целом, современные диагностические методики позволяют выявить паразитарные болезни всех органов и систем на самых ранних стадиях развития патологии. Подобное делает возможным предупреждение тяжелых последствий инвазии некоторыми разновидностями глистов. С этой целью среди населения должно проводиться скрининговое обследование на гельминтозы, должны предприниматься меры профилактики гельминтозов, основанные на повышении гигиенической грамотности населения и проведении курсов профилактической терапии.

Здоровье человека можно обеспечить только путем объединения медицинских, гигиенических и диагностических мероприятий.

1. Введение в терминологию

Основные типы лабораторных анализов, используемых при подозрении на гельминтоз, условно делятся на несколько типов:

  1. 1Различные модификации овоскопии, то есть исследование под микроскопом субстрата для обнаружения яиц гельминтов. Это и стандартный анализ кала на яйца глист (а также его модификации), и соскоб на энтеробиоз, и исследование дуоденального содержимого, и др. субстратов и биологических жидкостей (моча, мокрота, ликвор).
  2. 2Различные методы ларвоскопии. Ларвоскопия – это микроскопия личинок гельминтов, на территории РФ используется нечасто, наиболее актуальна для диагностики анкилостомоза, стронгилоидоза, онхоцеркоза и др. Также применяется при изучении послеоперационного материала и биопсийного материала при эхинококкозе, цистицеркозе и др. инвазиях.
  3. 3Гистологическое исследование тканей.
  4. 4Серологические реакции, часто называемые «анализы крови на гельминтов». Они представляют собой методы лабораторной диагностики, направленные на выявление специфических антител к определенным антигенам гельминтов, а также определение непосредственно этих антигенов в исследуемом материале.
  5. 5Определение генетического материала в различных субстратах (чаще кала, мокроты, крови) методом ПЦР. Метод в РФ не распространенный в виду дороговизны и слабой теоретической базы.
  6. 6Пробы, основанные на реакции гиперчувствительности замедленного типа (по аналогии с реакцией Манту). При этом пациенту с подозрением на гельминтоз внутрикожно вводится раствор, содержащий малые дозы антигена паразита, реакция оценивается по наличию гиперемии и папулы в месте инъекции.

В таблице 1 мы собрали наиболее популярные методы диагностики разных гельминтозов и их информативность. Как можно видеть, анализ крови на гельминты наиболее информативен при тканевых гельминтозах, а также трематодозах (описторхозе, клонорхозе, фасциолезе и др. паразитозах, обусловленных сосальщиками). Тканевые гельминтозы — это инвазии, обусловленные паразитированием личинок или взрослых особей вне кишечника, в тканях (мышцы, глаза, ЦНС, печень, легкие и др.).

Лабораторная диагностика гельминтов

Лабораторная диагностика гельминтов проводится с целью постановки верного диагноза, определения типа возбудителя и подбора методики лечения. Количество необходимых в каждом конкретном случае исследований определяет врач.

Гельминтозы — группа паразитарных заболеваний, возникновение которых провоцируют различные виды червей. Самые распространенные из них:

  • плоские,
  • круглые,
  • кольчатые,
  • волосатики,
  • скребни.

Первые признаки заболевания проявляются примерно через 2-4 недели после заражения гельминтами. Острая стадия сопровождается:

  • подъемом температуры,
  • нарушениями стула,
  • отечностью лица,
  • высыпаниями на коже,
  • сильным чувством голода,
  • ночным и утренним слюнотечением,
  • болями в мышцах и суставах,
  • снижением массы тела при повышенном аппетите,
  • воспалениями верхних дыхательных путей.

Не все симптомы проявляются сразу, чаще преобладают 2-3 из них. Острая стадия длится около недели, реже — до месяца, хроническая — значительно дольше. Чтобы вовремя выявить болезнь, проводят лабораторную диагностику гельминтов в условиях клиники. Самые распространенные тесты:

  • общий анализ крови — обычно характеризуется выраженной эозинофилией,
  • иммунологическое исследование для выявления антител к некоторым видам гельминтов,
  • анализ кала на яйца паразитов — для оценки интенсивности глистной инвазии,
  • макро- и микроскопия.
Это интересно:  Гельминты: что это такое у людей, фото и видео паразитов

Результаты будут готовы в кратчайшие сроки. Интерпретацию полученной информации проводит врач.

Анализы в «Литех»

Сеть лабораторий «Литех» приглашает пройти лабораторную диагностику гельминтов в любом из наших офисов. К Вашим услугам — весь комплекс диагностических процедур.

Чтобы максимально оценить состояние ЖКТ, а также определить генетическую предрасположенность к тому или иному течению заболеваний ЖКТ, рекомендуем, дополнительно, пройти генетическое обследование и заказать мужской / женский паспорт здоровья или специализированные генетические профили. Эта информация останется актуальной для Вас в течение всей Вашей жизни.

В стоимость паспорта здоровья входит:

  • забор крови из локтевой вены на анализ,
  • выделение ДНК ,
  • определение наиболее значимых полиморфизмов генов,
  • обработка результатов,
  • составление отчетного документа, включающего заключение врача-генетика, кандидата медицинских наук.

Для записи на лабораторную диагностику воспользуйтесь любым удобным для Вас способом:

  • посетите интернет-регистратуру и заполните форму на сайте,
  • позвоните в ближайший офис «Литех».

Остались вопросы? Обращайтесь — мы всегда рады помочь!

лабораторные исследования на паразитарные болезни

Полезная информация для каждого

лабораторные исследования на паразитарные болезни

Принципы организации и проведения лабораторных исследований на паразитарные болезни

Ежегодно на территории Российской Федерации регистрируется свыше одного миллиона человек больных гельминтозами и кишечными протозоозами. Свыше 270 видов паразитов (гельминтов, одноклеточных простейших) могут вызывать заражение людей паразитарными болезнями. Важность качественной лабораторной диагностики паразитарных болезней определяется во многом разнообразностью их клинической картины, а также нередки случаи латентного, субклинического течения.

Медицинским учреждениям, вне зависимости от подчиненности и форм собственности, осуществляющих на базе клинико-диагностических лабораторий и других испытательных лабораторных центров обследование населения на паразитарные болезни для правильной и эффективной диагностики необходимо организовывать эти исследования в соответствии с действующими нормативно-методическими документами:

§ МУК 4.2. 735–99«Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов»;

§ МУК 3.2. 987–00 «Паразитологические методы диагностики малярии»;

Качество и уровень выявляемости возбудителей паразитарных болезней при лабораторной диагностике зависят от профессиональной подготовки и опыта врачей и лаборантов лабораторного звена, а также от правильного забора материала и выполнения соответствующих методов исследования.

Для выявления возбудителей паразитарных болезней применяются: — прямые паразитологические методы, когда возбудитель (гельминты, их фрагменты, яйца и личинки гельминтов, цистные и вегетативные формы простейших) выявляются непосредственно в исследуемом биоматериале (кал, дуоденальное содержимое, моча, кровь, послеоперационный материал, содержимое язв и т.п.), и непрямые паразитологическиеметоды к которым относятся серологические (иммунологические) методы исследования, когда определяют выработку специфических антител организмом инвазированного человека в ответ на внедрение того или иного антигена (паразита).

При использовании в диагностике паразитологических методов исследования учитывается локализация паразитирования возбудителя в организме человека, от этого будет зависеть не только метод исследования, но правильный забор биоматериала, в котором вероятнее всего обнаруживается возбудитель. Например, кишечные гельминты, паразитирующие в просвете кишечника (аскариды, власоглав, тенииды, стронгилоиды, трихостронгилоиды) выявляются при исследовании кала. Но учитывается, и специфика выделения яиц гельминтом, так кишечный гельминт – острица, откладывает яйца на перианальных складках, поэтому исследуется соскоб (отпечаток) с перианальных складок, в кале яйца остриц можно обнаружить только при высокой интенсивности инвазии. Этот же метод соскоба (отпечатка) с перианальных складок применяется при определении онкосфер кишечных цестод – тениид, т.к. онкосферы из члеников в просвет кишечника не выделяются (матка у паразита в каждом членике «закрытого типа»), а остаются на перианальных складках в момент выхода члеников из ануса, в то же время сами членики можно выявить при исследовании кала. У цестоды – широкий лентец яйца и членики обнаруживаются в кале, т.к. в каждом членике матка выделяет яйца через выводное отверстие в просвет кишечника. Яйца возбудителей, паразитирующих в желчных протоках печени (описторх, клонорх, фасциола) обнаруживают при исследовании дуоденального содержимого (желчи) и кала. Личинки стронгилоид, паразитирующих в 12-и перстной кишке можно обнаружить и в дуоденальном содержимом, и в кале. Мокроту исследуют при подозрении на паразитирование легочных гельминтов (парагонимусы, метастронгилоиды). В моче могут быть обнаружены яйца возбудителя мочеполового шистосомоза. Кишечные патогенные простейшие – лямблии выявляются при исследовании кала, дуоденального содержимого; дизентерийные амебы, балантидии и криптоспоридии при исследовании кала.

Применяются при паразитологической диагностике исследования кала: — метод толстого мазка под гигроскопическим целлофаном по Като, — методы обогащения — седиментации (уксусно-эфирной, формалин-эфирной) и флотации, для выявления таких возбудителей как ооцисты криптоспоридий используется метод окрашенных мазков по Циль-Нильсену; для определения пневмоцист исследуют окрашенные мазки мокроты и т.д… Все перечисленные методы изложены в нормативном документе: МУК 4.2.735–99 «Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов».

Очень большое значение для организации достоверной диагностики имеет правильно организованный забор материала на исследование.

Забор и доставка крови на серологические исследования для опредения антител к антигенам паразитов.

Кровь у пациента забирается в процедурном кабинете лечебного учреждения из вены, натощак, объемом 3-5 мл (у ребенка до 2 мл) в стерильную пробирку без добавления консервантов. Доставляется кровь на исследование в день забора крови, в стерильной пробирке закрытой крышкой, в вертикальном положении. Нельзя перегревать и замораживать. Допускается доставка сыворотки крови (если есть возможность получения сыворотки крови в лабораторных условиях) без добавления консервантов. Сыворотка доставляется в день забора крови из вены у пациента или на следующий день после забора крови при условии хранения сыворотки не более 1 суток в холодильнике при температуре + 20 — +40 С. Замораживание крови допускается только в лабораторных условиях и однократно.

Забор и доставка биологического материла в лабораторию для исследования на кишечные гельминтозы и протозоозы

Фекалии. Доставляется на исследование кашицеобразный или оформленный кал в день дефекации (желательно утренний). При «тугом» кале или запорах желательно подготовить пациента и кал собрать для исследования после приема слабительных с учетом противопоказаний. Нельзя применять красящие кал пищевые продукты и лекарственные препараты (свекла, активированный уголь и т.д.)

Утренний кал без примеси мочи собирается в чистую, сухую стеклянную или пластиковую посуду (посуду можно вымыть и ополоснуть горячей водой в домашних условиях), объемом не менее одной чайной ложки. При этом объем должен быть взят из разных частей кала (начальных, средних и последние вышедших из прямой кишки).

Доставляют также в лабораторию подозрительные включения из кала (подвижные и неподвижные). Вечерний кал также можно собрать в чистую, сухую стеклянную или пластиковую посуду, но при условии хранения, до доставки в лабораторию, в холодильнике при температуре + 20 — +40 С не более 6-8 часов. Для исследования на простейшие (лямблии) кал должен быть доставлен утренний и в день дефекации.

Более длительное хранение кала после дефекации – до 2-х суток допускается при условии забора материала в консервант. При диагностике на простейшие лучше поместить кал в консервант Турдыева (1 часть кала размешать в 2-3 частях консерванта); для диагностики только на яйца, личинки гельминтов можно использовать консервант — раствор Барбагалло в тех же соотношениях. Хранить кал в консерванте до доставки в лабораторию необходимо в сухом, тёмном, прохладном месте.

Перианальный соскоб(отпечаток) – заранее подготовленными глазными палочками с нанесенным липким клеевым слоем у пациента с перианальных складок вокруг ануса делается отпечаток, при этом пациент не должен подмываться вечером и утром перед забором перианального соскоба (отпечатка). Палочки помещают в пронумерованные пробирки или специальные штативы и доставляют в лабораторию на исследование

Мокрота после откашливания (не слюна и не слизь из носоглотки!) доставляется в стерильной посуде и исследуется только свежевыделенная.

Моча утреннего сбора (все порции до обеда) доставляется в чистых сухих банках с крышками, не хранится, исследуется сразу после доставки.

Дуоденальное содержимое (желчь) – доставляется в химических или центрифужных пробирках, закрытых крышками. Порции А и В исследуются на простейших (лямблии) и личинок (стронгилоид), порция С на яйца печеночных гельминтов (описторх, клонорх, фасциола).

Прописи приготовления консервантов, клея для соскобов, химреактивов и красок для проведения методик исследования см. в МУК 4.2.735 –99 «Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов».

Кровь на кровепаразитов (малярийные плазмодии, лейшмании, филярии) – исследуется периферическая кровь, которая отбирается из пальца обычным гематоскопическим методом и из полученной крови на предметных обезжиренных новых и стерильных стеклах готовится микропрепарат «тонкий мазок» и «толстая капля». Высушенные на воздухе микропрепараты доставляются в лабораторию для специальных методов окраски и паразитологического исследования. Либо пациент направляется в лабораторию, где одновременно будет произведен забор крови из пальца, подготовлены микропрепараты и проведено паразитологическое исследование. Забор крови, методы приготовления микропрепаратов и методы исследования проводятся в соответствии с нормативным документом: МУК 3.2. 987 –00 «Паразитологические методы диагностики малярии».

Статья написана по материалам сайтов: www.sibmedport.ru, jktguru.ru, parazit24.me, www.analyz24.ru, www.labtechperm.ru.

«

Помогла статья? Оцените её
1 Star2 Stars3 Stars4 Stars5 Stars
Загрузка...
Добавить комментарий