Исследование дуоденального содержимого на простейшие гельминты

Методы лабораторной диагностики гельминтозов

Копрологические исследования (исследования кала) в диагностике гельминтозов имеют большое значение, так как многие гельминты паразитируют в кишечнике или органах с ним связанных, а яйца их выделяются с испражнениями.

Испражнения исследуются двумя методами:

1. Макроскопический – обнаруживают гельминтов, их головки, членики, обрывки стробилы. Небольшие порции кала, перемешивают с водой в плоской ванночке или чашке Петри и просматривают при хорошем освещении на темном фоне, при необходимости пользуясь лупой. Все подозрительные образования пинцетом переносят в другую чашку с водой или на предметное стекло в каплю разведенного глицерина.

При методе отстаивания исследуемую порцию фекалий размешивают с водой в стеклянном цилиндре, после отстаивания сливают верхний слой воды. Так повторяют несколько раз. Когда жидкость станет прозрачной ее сливают, а осадок просматривают в чашке Петри.

2. Микроскопический – для обнаружения яиц и личинок гельминтов. Существует много методов исследования.

1). Нативный мазок – наиболее распространенный и технически доступный метод исследования. Можно обнаружить яйца и личинки всех гельминтов. Однако, при небольшом количестве яиц их не всегда удается найти. Поэтому используется метод обогащения.

1). Метод Фюллеборга – это метод обогащения, основан на всплытии яиц гельминтозов в насыщенном растворе NaCl (1,2 – плотность; 400 г NaCl на 1 литр воды; 40% раствор NaCl). Метод более эффективен, чем нативный мазок. В стеклянные банки помещают 2-5 г фекалий и заливают раствором NaCl, размешивают и через 45 минут снимают образовавшуюся пленку металлической петлей, помещают каплю глицерина на предметное стекло. Исследуют под микроскопом. Недостаток метода – замедленное высплывание яиц различных гельминтов, карликовый цепень – через15-20 минут, аскарид – 1,5 часа, власоглав – 2-3 часа.

2) Метод Калантарян – также метод обогащения, но применяется насыщенный раствор NaNO3 (1,38 плотность). Большинство яиц всплывает, не требуется исследования осадка. Недостаток – длительное выдерживание яиц в растворе, приводит к тому, что некоторые яйца начинают набухать и оседать на дно, исчезая с поверхностной пленки.

5. Метод Бермана – основан на способности, личинок гельминтов мигрировать, по направлению к теплу, и служит для выявления их в фекалиях.

6. Метод Харада и Мори (метод выращивания личинок) и рекомендуется для исследования на анкилостомитозы. Метод основан на том, что в тепле и на влажной фильтрованной бумаге из яиц анкилостомид развиваются филяриевидные личинки, которые легко можно обнаружить. На середину полоски фильтрованной бумаги наносят 15 г кала, бумагу с фекалиями помещают в банку, так, чтобы нижний конец был погружен в воду, а верхний закреплен пробкой. Банку выдерживают в термостате 28 0 С в течение 5-6 дней. Филяриевидные личинки развиваются за это время и спускаются в воду. Жидкость исследуют под лупой. Если трудно обнаружить, жидкость центрифугируют, убив предварительно личинок нагреванием до 60 0 . Лаборант должен работать в перчатках.

7. Методы на энтеробиоз – выявление яиц острицы и бычьего цепня.

а) соскоб с перианальных складок – ватным тампоном, туго намотанным на деревянную палочку и смоченную 50% раствором глицерина. В лаборатории тампон смывают 1-2 каплями 50% водным раствором глицерина.

б) метод липкой лепты (метод Грэхэма)

Липкую ленту прикладывают к перианальным складкам, затем липким слоем к предметному стеклу и микроскопируют.

В) соскоб с помощью глазных палочек (метод Рабиновича). Для перианального соскоба используют стеклянные глазные палочки, широкая часть которых покрывается специальным клеем, что позволяет удерживать яйца остриц.

Исследование крови, желчи, мокроты и мышц

Микроскопия крови – обнаруживают личинки филярий.

Исследование дуоденального содержимого и желчи. Яйца и личинки гельминтов паразитирующих в печени, желчном пузыре, поджелудочной железе (описторхоз, фасциолез, дикроцелилз) и двенадцатиперстной кишке (стронгилоидоз).

Исследование мокроты – яйца параганима, личинки аскариды, некатора, стронгилоида, элементы эхинококкового пузыря.

Исследование мышц – при подозрении на трихинеллез исследуют мышцы больного или трупа, а также мясо, предположительно послужившего причиной заражения человека. С целью трихинеллоскопии мышцу разрезают на мелкие кусочки и помещают в компрессорий, это два широких, толстых стекла, которые раздавливают мышцы и личинки трихинеллы обнаруживаются в виде капсул – метод компрессии.

Метод переваривания – мышцы заливают искусственным желудочным соком (раствор соляной кислоты и пепсин). Мышцы перевариваются, а личинки легко выявляются. Определение интенсивности инвазии: количество личинок до 200 на 1 г мышечной ткани – умеренная интенсивность инвазии; до 500 – интенсивная; свыше 500 – сверхинтенсивная инвазия.

Серологические методы исследования (выявление антител в сыворотке крови) используются для диагностики трихинеллеза, эхинококкоза, альвеококкоза, цистицеркоза и ряда других гельминтов. Эти методы особо ценны, когда наличие паразита в организме другими более доступными путями доказать не удается. Следует учитывать, что серологические реакции не являются абсолютным показателем наличия или отсутствия паразита, что обусловлено и состоянием иммунитета и спецификой той или иной реакции.

Глава III. Диагностика гельминтозов (Василькова, 1953г)

Полное содержание книги Основные гельминтозы человека и борьба с ними (З. Г. Василькова, 1953г) смотри здесь

Глава III. Диагностика гельминтозов и методы гельминтологических исследований

При изучении клинической картины различных гельминтозов специфические явления, характерные для определенного гельминтоза и отличающие его от заболеваний иной этиологии, обычно не наблюдаются. Поэтому точный диагноз гельминтозов не может быть поставлен на основании только клинической картины, а должен подтверждаться лабораторными методами исследования, а также собиранием сведений о выделении паразитов (аскарид, остриц) или их фрагментов (члеников тениид).

Это интересно:  Антитела к гельминтам в крови инвитро

Необходимо обследовать на гельминтозы всех больных, обращающихся за медицинской помощью, и особенно больных, обращающихся к педиатру, терапевту и невропатологу с жалобами на явления со стороны желудочно-кишечного тракта, нервной системы и с анемией. Если врач не всегда может применить лабораторные методы исследования, то опросить больного о выделении у него гельминтов обязан каждый медицинский работник, оказывающий помощь в амбулатории или стационаре.

При наличии приведенных в соответствующих главах клинических показаний следует уточнить диагноз при помощи лабораторных методов исследования на гельминтозы.

Диагноз гельминтозов ставится при обнаружении паразитов, их члеников или яиц (специальные методы исследования) и при наличии реакций, вызываемых гельминтами в организме хозяина (подсобные методы). Объектами исследования при гельминтозах являются: 1) испражнения, 2) выделенные паразиты, 3) ректальная и перианальная слизь, 4) содержимое подногтевых пространств, 5) дуоденальное содержимое, 6) мокрота, 7) кровь, 8) частицы тканей.

В связи с преобладанием кишечных гельминтозов наибольшее практическое значение имеет исследование испражнений.

Методы исследования испражнений на гельминтозы

Испражнения доставляются в лабораторию в чистой стеклянной посуде (около четверти стакана испражнений, взятых из разных мест одной порции); при плановом обследовании допускается доставка испражнений в лабораторию в спичечных или лубочных коробочках.

Для контроля дегельминтизации доставляется (по назначению врача) вся порция испражнений, собранная после приема противоглистного средства и слабительного (в больших закрытых стеклянных банках, ведрах).

Микроскопическое исследование испражнений является основным при диагностике кишечных гельминтозов; ему всегда должен предшествовать общий макроскопический осмотр фекалий для обнаружения члеников крупных цестод, остриц, аскарид и др.

Испражнения должны быть свежими или консервированными (в 5% растворе формалина), так как высыхание резко изменяет структуру яиц. Кроме того, при стоянии фекалий происходит быстрое развитие яиц некоторых гельминтов (например, анкилостом), что затрудняет диагностику.

Согласно инструкции Министерства здравоохранения СССР, необходимо исследовать испражнения одновременно по методу Фюллеборна и нативного мазка.

Нативный мазок

Нативный мазок: небольшой кусочек фекалий (с горошину), взятый спичкой, стеклянной или деревянной палочкой из разных мест доставленной порции, тщательно растирают на предметном стекле в капле 50% раствора глицерина или в физиологическом растворе, или в воде. Накрывают покровным стеклом, слегка надавливая последнее (препаровальной иглой). Мазок должен быть тонким, прозрачным и равномерным. Он применяется лишь как дополнение к другим методам, дающим обогащение препарата. Просматривать следует не менее двух препаратов.

С целью обнаружения личинок гельминтов (а также яиц их) нативный мазок делается следующим образом (по Шульману): 2-3 г фекалий тщательно размешивают «закручиванием» стеклянной палочкой в эмульсию с пятикратным количеством чистой воды или физиологического раствора. Во время размешивания личинки скопляются у стеклянной палочки, поэтому тотчас после окончания размешивания каплю эмульсии быстро переносят стеклянной палочкой на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют. С. Д. Любченко (1936) доказала, что метод закручивания является более эффективным, чем метод мазка, особенно в отношении яиц аскарид. На основании работы С. Д. Любченко мы считаем целесообразным заменить метод мазка методом закручивания.

Метод Фюллеборна

Тотчас после приготовления суспензии с поверхности ее удаляют шпателем, металлическим совочком или кусочком чистой бумаги всплывшие на поверхность крупные частицы (растительные образования, непереваренные остатки пищи и пр), после чего смесь оставляют стоять на 1-1,5 часа. По истечении этого времени с поверхности смеси снимают всю пленку прикосновением проволочной или платиновой петли (плашмя) диаметром не больше 1 см, согнутой под прямым углом; пленку стряхивают на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Под каждое покровное стекло (18х18 мм) помещают 3-4 капли. Всего следует приготовить не менее 4 препаратов (на каждый препарат — одно покровное стекло). Петлю прокаливают на огне и промывают водой после каждого анализа.

По методу Фюллеборна быстро и легко обнаруживаются яйца всех нематод (за исключением неоплодотворенных яиц аскарид) и яйца карликового цепня.

Яйца трематод и крупных ленточных гельминтов всплывают плохо, поэтому в районах широкого распространения этих гельминтов рекомендуется дополнительно просматривать 2-4 препарата со дна смеси. После снятия пленки с поверхности смесь выливают из посуды, оставляя на дне небольшой слой ее; 4-6 капель осадка переносят пипеткой или платиновой петлей на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют. Для просветления к капле осадка прибавляют каплю глицерина.

Исследование дуоденального содержимого

С целью выявления заболеваний желчных путей применяется метод дуоденального зондирования с последующим изучением содержимого двенадцатиперстной кишки.

Разработано несколько модификаций и усовершенствований данного метода:

1) хроматическое дуоденальное зондирование (метиленовый синий, принятый внутрь, попадая в желчный пузырь, окрашивает пузырную желчь в сине-зеленый цвет).

2) многомоментное фракционное дуоденальное зондирование (5-фракционное) с точным учетом количества желчи в порциях и длительности фаз выделения желчи;

3) внедрение двойного гастродуоденального зонда позволило наиболее полно собирать отдельно желудочное и дуоденальное содержимое.

Многомоментное фракционное дуоденальное зондирование

Для дуоденального зондирования применяют тонкий зонд с металлической оливой, имеющей отверстия.

Исследование производится натощак. Для получения пузырной желчи вводят вещество, вызывающее сокращение желчного пузыря. Чаще всего используют 33 %-ный раствор магния сульфата, сорбит, ксилит. При проведении многомоментного фракционного зондирования желчь собирают в отдельные пробирки через каждые 5 или 10 мин. Фиксируют время истечения каждой порции желчи, ее количество.

Это интересно:  Лекарство от гельминтов для человека: виды препаратов и средств с широким спектром действия

Относительная плотность 1,003-1,016. Реакция нейтральная или щелочная. Уменьшение количества желчи в I фазу — гипосекреция, а также выделение более светлой желчи отмечается при поражении печеночной паренхимы, нарушении проходимости общего желчного протока. Гипосекреция в этой фазе часто наблюдается при холецистите. Увеличение количества выделяемой желчи — гиперсекреция — возможно после холецистэктомии, при нефункционирующем желчном пузыре, при гемолитической желтухе.

II фаза — закрытого сфинктера Одди — время отсутствия желчи от момента введения раздражителя до появления желчи А1. Продолжительность фазы 3-6 мин. Укорочение II фазы может быть обусловлено гипотонией сфинктера Одди или повышением давления в общем желчном протоке. Удлинение ее может быть связано с гипертонией сфинктера Одди, стенозом дуоденального сосочка. Замедление прохождения желчи через пузырный проток, в частности при желчнокаменной болезни, также обусловливает удлинение этой фазы.

III фаза — желчь А1 — печеночная желчь из ductus holedochus после введения раздражителя до появления желчи В. Отражает состояние желчных путей внутри печени. Продолжительность фазы 3-4 мин. Количество 3-5 мл. Цвет золотистый. Консистенция тягучая. Относительная плотность 1,007-1,005. Реакция щелочная. Удлинение Ш фазы может наблюдаться при атонии желчного пузыря или его блокаде. Количество желчи этой фракции уменьшается при тяжелых поражениях печени и увеличивается при расширении общего желчного протока.

Отсутствие желчи В наблюдается в следующих случаях:

1) закупорка пузырного протока камнем или новообразованием;

2) нарушение сократительной способности желчного пузыря вследствие воспалительных изменений;

3) потеря желчным пузырем способности концентрировать желчь вследствие воспалительных изменений;

4) отсутствие «пузырного» рефлекса, т. е. опорожнения желчного пузыря в ответ на введение общепринятых раздражителей.

V фаза — «печеночная» желчь С — желчь, попадающая в двенадцатиперстную кишку в период зондирования. Отражает состояние мелких желчных путей внутри печени.

Микроскопическое исследование необходимо проводить сразу же после получения дуоденального содержимого. Желчь из пробирки выливают в чашку Петри и рассматривают на белом и черном фоне. Пастеровской пипеткой вылавливают хлопья слизи, переносят их на предметное стекло, накрывают покровным и изучают под микроскопом (окуляр Юх, объектив 40х).

В разных порциях желчи возможно выявление слизи, лейкоцитов, кристаллов холестерина, билирубина, билирубината кальция, эпителиальных клеток. В норме клеточные элементы либо отсутствуют, либо встречаются единичные лейкоциты, эритроциты.

Большое количество лейкоцитов в порциях В и С может указывать на наличие воспалительного процесса в желчевыводящих путях (холецистит, холецистохолангит). Также возможно их внежелчное происхождение (примесь желудочного и панкреатического соков, миграция из слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки — пищевой лейкопедез).

Наличие большого количества круглых эпителиальных клеток в порциях В и С (лейкоцитоидов) может быть обусловлено патологическими изменениями в двенадцатиперстной кишке, влиянием вводимых желчегонных средств (сернокислой магнезии). Обнаружение цилиндрических эпителиальных клеток является более диагностически значимым для верификации воспаления желчных путей.

Обнаружение в дуоденальном содержимом кристаллических и аморфных осадочных образований желчи указывает на то, что она потеряла свою коллоидную стабильность. Причиной появления их может быть воспалительный процесс в желчных путях, нарушение коллоидной стабильности в результате длительного стояния или попадания в желчь желудочного содержимого. Диагностическое значение имеют следующие кристаллические образования: микролиты, кристаллы холестерина, желчные и жирные кислоты, билирубинат кальция.

Микролиты — темноватые, округлые или многогранные компактные образования, иногда имеющие концентрическую исчерченность; состоят из извести, слизи и небольшого количества холестерина.

Кристаллы холестерина — тонкие, бесцветные четырехугольные пластинки, иногда с «обломанным» углом. Билирубинат кальция представляет собой аморфные крупинки бурого, черного, коричневого или золотисто-желтого пигмента. Часто встречается в сочетании с кристаллами холестерина.

Кристаллы жирных кислот

Нежные, тонкие, бесцветные иглы, превращающиеся при подогревании нативного препарата на пламени спиртовки в капли, имеют диагностическое значение только при исключении попадания в желчь желудочного содержимого.

Простейшие и гельминты

Исследование дуоденального содержимого рекомендуется проводить при подозрении на гельминтозы печени и желчного пузыря (описторхоз, фасциолез, клонорхоз, дикроцелиоз) и двенадцатиперстной кишки (стронгилоидоз, трихостронгилоидоз). Из простейших в дуоденальном содержимом чаще всего определяются лямблии.

Бактериологическое исследование желчи проводится для определения состава микрофлоры и чувствительности ее к антибиотикам.

Биохимическое исследование желчи дает представление о концентрационной функции желчного пузыря и коллоидальной устойчивости желчи, а также о наличии воспалительного процесса. В связи с этим производят определение билирубина, холестерина, желчных кислот, липидных комплексов, белка, СРБ. Чаще всего эти исследования проводятся в научных целях. Однако высокая распространенность желчнокаменной болезни в мире требует решения проблемы диагностики этого заболевания на ранней физико-химической стадии его развития.

Исследование дуоденального содержимого

Исследование дуоденального содержимого или дуоденальное зондирование – это инструментальный метод обследования, применяемый при различных заболевания печени и желчного пузыря, включая также паразитарную этиологию заболевания.

Суть метода заключается в ведении исследуемому в двенадцатиперстную кишку зонда с металлической оливой на конце и получение содержимого из кишечника во время стимуляции желчного пузыря.

Методика выполнения процедуры и подготовка пациента

Зонд для исследование дуоденального содержимого это резиновая трубка, длинной 1,5м, диаметром – 3 – 5мм, на конце зонда расположено металлическое утолщение – олива с рядом отверстий. На зонде находится ряд отметок – на расстоянии 45см, 70см. 80см и так до 1,5м. Перед проведением исследования зонд кипятят и остуживают в прохладной воде.

За сутки до обследования пациенту вводят раствор атропина подкожно, либо дают выпить 8 капель. После пациент выпивает пол стакана теплой воды с растворенным в ней сорбитом или ксилитом. Исключаются продукты, которые ведут к повышенному газообразованию (хлеб, цельное молоко и кисломолочные продукты, картофель, кукуруза, капуста, напитки содержащие углекислый газ).

  • на дуоденальном зонде отмечают расстояние от резцов (передних зубов) до пупа в положении пациента стоя.
  • Пациента садят на кресло, конец зонда с оливой кладут на корень языка и просят глубоко дышать и совершать активные глотательные движения.
  • как только олива попала в желудок, это первая отметка на зонде, больного кладут на кушетку на правый бок, предварительно положив туда теплую грелку, замотанную в полотенце.
  • пациент продолжает глотать, а вместе с этим необходимо начинать аспирацию содержимого желудка, для того чтобы открылся привратник (сфинктер между желудком и двенадцатиперстной кишкой) и олива прошла в ампулу двенадцатиперстной кишку.
  • при своевременном открытии сфинктера олива попадает в полость кишечника через 1 – 1,5 часа, если открытие не произошло, то пациенту подкожно вводят атропин, или папаверин, или дают выпить стакан 1% раствора соды.
Это интересно:  Механические переносчики цист простейших и яиц гельминтов

Для уточнения местоположения оливы пользуются рентгеном или с помощью шприца вводят воздух через зонд, если пациент отмечает вздутие и бульканье – зонд в желудке, ели никаких неприятных ощущений нет – зонд в двенадцатиперстной кишке.

  • порция А – выделяется из зонда сразу после попадания в двенадцатиперстную кишку.
  • после сбора первой порции по зонду вводят вещества, которые раздражают сфинктеры желчного пузыря – раствор магнезии, оливковое масло, глюкозу, 10% раствор натрия хлорида. После этого зонда закрывают на 15 – 20 минут.
  • после этого выделяется порция В – содержимое желчного пузыря.
  • порция С выделяется после полного опорожнения желчного пузыря из внутрипеченочных желчных ходов.
  • после получения порции С зонд извлекают.

Методы диагностики гельминтозов

Различные методики диагностики гельминтозов позволяют не только выявить гельминт, но и определить интенсивность паразитарной инфекции.

Гельминтозы – это группа паразитарных заболеваний, которые встречаются как у человека, так и у животных. На сегодняшний день идентифицированы сотни видов различных гельминтов. Чаще всего встречаются плоские и круглые черви, а также нематоды, скребни и другие виды. В организме человека могут паразитировать более 300 видов различных гельминтов.

Паразиты способны поражать не только желудочно-кишечный тракт, но и любые другие органы: печень, мозги, глаза, сердце.

Чаще всего заражение гельминтами происходит через зараженную пищу, воду, а также через немытые руки.

Прямые и косвенные методы диагностики гельминтозов

На сегодняшний день разработано множество методов диагностики гельминтозов, однако всех их можно разделить на две большие группы: прямые и косвенные. К прямым методам диагностики относятся те исследования, которые позволяют непосредственно выявить гельминты, их фрагменты, личинки или яйца. Косвенные методы диагностики гельминтозов основываются на выявлении вторичных изменений, характерных для той или иной разновидности гельминтоза.

Самыми популярными прямыми методами диагностики гельминтозов являются макро- и микрогельминтоскопические методы исследований.

Макрогельминтоскопические методы исследования

Макроскопические исследования позволяют обнаружить гельминтов (или их фрагменты) в фекалиях больного. Некоторых паразитов удается выявлять невооруженным глазом. Также макроскопические методы исследований предусматривают использование чашек Петри и лупы для выявления более мелких паразитов. С помощью макроскопических методов исследования выявляются аскариды и острицы.

Микрогельминтоскопические методы исследования

С помощью микроскопических методов исследования удается обнаружить яйца и личинки паразитов. Для этого может применяться метод Като, предусматривающий анализ толстого мазка на покровной пластинке. Метод Като не позволяет выявить все виды гельминтов, поэтому часто данное исследование дополняется методами копровоскопии (метод Фюллеборна или метод Калантаряна), предусматривающие подкрашивание кала для достижения контраста. При сочетании метода Като с количественными методами исследования (например, метод Столла) удается определить интенсивность паразитарной инвазии.

Иммунологические методы исследования

Иммунологические методы диагностики гельминтозов основаны на обнаружении в сыворотке крови специфических антител к тем или иным гельминтам. Для иммунологического исследования применяется метод непрямой гемагглютинации, иммуноферментного анализа, иммуноэлектрофореза, иммуноабсорбции и другие серологические методы исследований крови.

Иммунологические методы исследования применяются для диагностики альвеококкоза, эхинококкоза, цистицеркоза, аскаридоза, шистосомоза и других гельминтозов.

Анализ желчи и дуоденального содержимого

Анализ желчи и дуоденального содержимого проводится в том случае, когда имеются подозрения на поражения паразитами печени, желчного пузыря или двенадцатиперстной кишки. Иногда с помощью данного исследования выявляется описторхоз, клонорхоз, стронгилоидоз и другие гельминтозы.

Биопсия

Некоторые виды гельминтов паразитируют в мышечных тканях (например, трихинеллы). В данном случае исследование биоптатов (образцов тканей, взятых при биопсии) позволяет установить точный диагноз.

Электропунктурная диагностика

Электропунктурная диагностика основана на анализе сопротивления кожи при раздражении ее слабым электрическим током. Электропунктурная диагностика при подозрении на гельминтоз может проводиться двумя способами: по методу Фолля или с помощью резонансного тестирования.

Инструментальные методы исследования

При гельминтозах также проводится ультразвуковое исследование, ФЭДГС, рентгенография и компьютерная диагностика. Эти методы позволяют определить степень вреда, нанесенного гельминтами, а также определить состояние отдельных органов.

Статья написана по материалам сайтов: studfiles.net, diagnoster.ru, xn--80ahc0abogjs.com, parazitus.ru, www.likar.info.

«

Помогла статья? Оцените её
1 Star2 Stars3 Stars4 Stars5 Stars
Загрузка...
Добавить комментарий